Obrazowanie pszczół miodnych metodą MALDI w celu oceny wpływu czynników stresogennych

Metoda obrazowania MALDI pszczół miodnych służąca do oceny molekularnych reakcji na stres, ze szczególnym uwzględnieniem zmian proteomicznych spowodowanych zakażeniem Nosema ceranae. Opracowany w ramach projektu PoshBee czterostopniowy proces obejmuje pobieranie próbek, perfuzję i osadzanie w 2% roztworze CMC, kriosekcję o grubości 15 µm oraz spektrometrię masową z desorpcją/jonizacją laserową wspomaganą matrycą (MALDI) z użyciem DHB na szkiełkach z ITO. Metoda ta, zoptymalizowana pod kątem wykrywania peptydów i białek o masie do 15 kDa w przekrojach całego ciała Apis mellifera, umożliwia przestrzenne mapowanie profili molekularnych w jelitach, mózgu, zwojach piersiowych, gruczołach podgardłowych oraz hemolimfie. Analiza PCA ujawniła charakterystyczne wzorce jonowe u zakażonych pszczół, wskazujące na zaburzenia odporności i integralności mięśni. Protokół ten stanowi podstawę dla przyszłych badań nad neonikotynoidami (np. sulfoxaflorem) oraz infekcjami wirusowymi. Metoda, zweryfikowana na pszczołach niezainfekowanych, pozwala stworzyć atlas histo-molekularny. Obrazowanie MALDI wyróżnia się wszechstronnością w badaniach środowiskowych i biomedycznych, z zastosowaniami w badaniach kręgowców, bezkręgowców, tkanek roślinnych oraz ludzkiego mózgu.