Vliv antimitotik a hormonů na produkci zelených dvojitě haploidních rostlin prostřednictvím kultivace prašníků u středomořské odrůdy rýže japonica

Rostliny rýže s dvojitým haploidním genotypem (DH) se získávají především pomocí kultivace prašníků. Za účelem zdokonalení protokolu pro kultivaci prašníků byly mikrospory dvou genotypů rýže japonica (NRVC980385 a H28) na indukčním médiu vystaveny třem kombinacím růstových regulátorů a čtyřem ošetřením kolchicinem. Dále byl testován postup následný po kultivaci prašníků s použitím kolchicinu nebo oryzalinu za účelem indukce dvojitě haploidních rostlinek z haploidních rostlinek. Předběžná úprava mikrospor chladem po dobu 9 dnů při teplotě 10 °C zvýšila indukci kalusu u genotypu NRCV980385 50krát. U obou genotypů poskytly nejlepší kultivační odezvy 2 mg L−1 2,4-D a 1 mg L−1 kinetinu na indukčním médiu bez kolchicinu. Kultivovatelnost obou genotypů se na indukčních médiích doplněných kolchicinem změnila. U indukce kalusu, regenerace zelených rostlinek z kalusu a regenerace zelených dvojitě haploidních rostlinek byla zaznamenána vysoká závislost na genotypu. Kolchicin v koncentraci 300 mg L−1 po dobu 48 hodin zvýšil indukci kalusu u H28 100krát. Média doplněná kolchicinem jasně zlepšila regeneraci zelených dvojitě haploidních rostlinek. Ukázali jsme, že ošetření haploidních rostlinek po kultivaci prašníků 500 mg L−1 kolchicinu umožnilo vytvoření plodných dvojitě haploidních rostlinek. Nakonec byl testován vylepšený protokol průtokové cytometrie se střední propustností pro rýži, aby bylo možné analyzovat všechny rostlinky z kultivace prašníků a po kultivaci prašníků.