MALDI-avbildning av honungsbin för bedömning av stressfaktorers påverkan

MALDI-avbildningsmetod för honungsbin för bedömning av molekylära stressreaktioner, med fokus på proteomiska förändringar till följd av Nosema ceranae-infektion. Arbetsflödet, som utvecklats inom PoshBee-projektet, består av fyra steg: provtagning, perfusion och inbäddning i 2 % CMC, kryosektionering till 15 µm samt matrisassisterad laser desorption/ionisering-masspektrometri (MALDI) med användning av DHB på ITO-glasobjektglas. Metoden är optimerad för att detektera peptider och proteiner upp till 15 kDa i helkroppssnitt av Apis mellifera och möjliggör rumslig kartläggning av molekylära profiler i tarm, hjärna, bröstganglier, hypofaryngeala körtlar och hemolymf. PCA avslöjade distinkta jonmönster hos infekterade bin, vilket indikerar förändrad immunitet och muskelintegritet. Protokollet stödjer framtida studier av neonicotinoider (t.ex. sulfoxaflor) och virusinfektioner. Metoden har validerats på icke-infekterade bin och utgör grunden för en histomolekylär atlas. MALDI-avbildning framhålls för sin mångsidighet inom miljö- och biomedicinsk forskning, med tillämpningar på ryggradsdjur, ryggradslösa djur, växtvävnader och studier av den mänskliga hjärnan.