Vpliv antimitotikov in hormonov na pridelavo zelenih dvojno haploidnih rastlin s kultivacijo prašnikov sredozemskega riža sorte japonica

Rastline riža z dvojnim haploidom (DH) se pridobivajo predvsem s kultivacijo prašnikov. Z namenom izboljšanja protokola za kultivacijo prašnikov so bile mikrospore dveh genotipov riža japonica (NRVC980385 in H28) na indukcijskem gojišču izpostavljene trem kombinacijam rastnih regulatorjev in štirim obdelavam s kolhicinom. Poleg tega je bil preizkušen postopek po kultivaciji prašnikov z uporabo kolhicina ali orizalina za indukcijo rastlinic z dvojnim haploidom iz haploidnih rastlinic. Predhodna obdelava mikrospor s hladom 9 dni pri 10 °C je pri genotipu NRCV980385 50-krat povečala indukcijo kalusa. Pri obeh genotipih sta 2 mg L−1 2,4-D in 1 mg L−1 kinetina na indukcijskem mediju brez kolhicina dajala najboljše odzive pri gojenju. Gojljivost obeh genotipov se je spremenila na indukcijskih medijih, dopolnjenih s kolhicinom. Za indukcijo kalusa, regeneracijo zelenih rastlinčkov iz kalusa in regeneracijo zelenih dvojno haploidnih rastlinčkov je bila zabeležena visoka odvisnost od genotipa. Kolhicin v koncentraciji 300 mg L−1 za 48 ur je pri genotipu H28 100-kratno povečal indukcijo kalusa. Gojišča, dopolnjena s kolhicinom, so jasno izboljšala regeneracijo zelenih dvojno haploidnih rastlinčkov. Pokazali smo, da je obdelava haploidnih rastlinčkov s 500 mg L−1 kolhicina po kultiviranju prašnikov omogočila nastanek plodnih dvojno haploidnih rastlinčkov. Nazadnje je bil preizkušen izboljšani protokol pretočne citometrije srednje zmogljivosti za riž, da bi analizirali vse rastlinčke iz kultiviranja prašnikov in po kultiviranju prašnikov.