MALDI-imaging včiel medonosných na posúdenie vplyvu stresových faktorov

Metóda MALDI zobrazovania u medonosných včiel na hodnotenie molekulárnych reakcií na stres so zameraním na proteomické zmeny spôsobené infekciou Nosema ceranae. Tento štvorfázový pracovný postup, vyvinutý v rámci projektu PoshBee, zahŕňa odber vzoriek, perfúziu a zalievanie do 2 % CMC, kryosekciu s hrúbkou 15 µm a hmotnostnú spektrometriu s laserovou desorpciou/ionizáciou podporovanou matricou (MALDI) s použitím DHB na sklíčkach z ITO-skla. Metóda je optimalizovaná na detekciu peptidov a proteínov s molekulovou hmotnosťou až 15 kDa v rezoch celého tela včely Apis mellifera a umožňuje priestorové mapovanie molekulárnych profilov v čreve, mozgu, hrudných gangliách, hypofaryngeálnych žľazách a hemolymfe. Analýza hlavných komponentov (PCA) odhalila u infikovaných včiel odlišné iontové vzory, čo naznačuje zmenenú imunitu a integritu svalov. Protokol podporuje budúce štúdie zamerané na neonikotinoidy (napr. sulfoxaflor) a vírusové infekcie. Metóda bola validovaná na neinfikovaných včelách a vytvára histomolekulárny atlas. Zobrazovanie pomocou MALDI vyniká svojou univerzálnosťou v environmentálnom a biomedicínskom výskume, s aplikáciami pri štúdiu stavovcov, bezstavovcov, rastlinných tkanív a ľudského mozgu.