Imagem MALDI de abelhas melíferas para avaliação do impacto de fatores de stress

Método de imagiologia MALDI em abelhas melíferas para avaliar respostas moleculares ao stress, com foco nas alterações proteómicas decorrentes da infeção por Nosema ceranae. Desenvolvido no âmbito do projeto PoshBee, o fluxo de trabalho de quatro etapas inclui a recolha de amostras, a perfusão e a inclusão em CMC a 2%, o corte criogénico a 15 µm e a espectrometria de massa por desorção/ionização a laser assistida por matriz (MALDI), utilizando DHB em lâminas de vidro ITO. Otimizado para a deteção de péptidos e proteínas até 15 kDa em secções de corpo inteiro de Apis mellifera, o método permite o mapeamento espacial de perfis moleculares no intestino, cérebro, gânglios torácicos, glândulas hipofaríngeas e hemolinfa. A análise de componentes principais (PCA) revelou padrões iónicos distintos nas abelhas infetadas, indicando alterações na imunidade e na integridade muscular. O protocolo apoia estudos futuros sobre neonicotinóides (por exemplo, sulfoxaflor) e infeções virais. Validado em abelhas não infetadas, estabelece um atlas histomolecular. A imagem por MALDI destaca-se pela sua versatilidade na investigação ambiental e biomédica, com aplicações em vertebrados, invertebrados, tecidos vegetais e estudos do cérebro humano.