A Nosema apis, a Nosema ceranae és a Nosema bombi mennyiségének meghatározására szolgáló qPCR-módszerek kidolgozása és validálása méhekben

Ez a tanulmány specifikus, érzékeny és pontos, szondán alapuló valós idejű qPCR-módszereket fejleszt ki és validál három, a méheket fertőző legfontosabb mikrosporidia – a Nosema apis, Nosema ceranae és Nosema bombi – mézelő méhekben (Apis mellifera), poszméhekben (Bombus terrestris) és kőművesméhekben (Osmia bicornis). Az egy példányban előforduló, erősen konzervált RPB1 gént célzó vizsgálatok magas hatékonyságot (95–110%), alacsony variabilitást és 2,0–4,0 log10 másolat/méh közötti kimutatási határértékeket érnek el. A módszerek mindhárom méhfajnál specifitást, átfogó jelleget és robusztusságot mutatnak, a mézelő méhek esetében a validált kvantifikációs tartomány 4–10,3 log10 másolat/méh. A nyers Cq-értékekben fellelhető szisztematikus torzításokat korrigálták, ami jelentősen javította a pontosságot és a precizitást, így a módszer megfelel a francia szabványok valódiságra és reprodukálhatóságra vonatkozó követelményeinek. A megközelítés a többszörös másolatú rRNS-gének korlátait egy másolatú célmolekulák használatával küszöböli ki, növelve ezzel a diagnosztikai megbízhatóságot. A módszerek alkalmasak nagy áteresztőképességű szűrésre, és támogatják a vírusokkal és más kórokozókkal való koinfekciók kutatását, lehetővé téve a parazita-dinamika és a méhek egészségügyi kockázatainak jobb értékelését. A tanulmány harmonizált, validált molekuláris eszköztárat biztosít a nosemózis felügyeletéhez és ökológiai vizsgálatához tenyésztett és vadon élő beporzók esetében.