Entwicklung einer Echtzeit-RT-PCR-Methode zum breitbandigen Nachweis des Grapevine Leafroll-Associated Virus-2 bei Weinreben

Das GLRaV-2, das zur Gattung Closterovirus der Familie der Closteroviridae gehört, ist eine der fünf Virusarten, die an der viralen Rollkrankheit der Rebe beteiligt sind. Es besteht aus sechs molekularen Varianten, die bis zu 30 % Nukleotidunterschiede aufweisen. Die Entwicklung eines Nachweistests für GLRaV-2 mittels Echtzeit-RT-PCR erforderte die Konstruktion spezifischer und universeller Primer für diese verschiedenen Varianten. Diese Nachweismethode wurde an einem internationalen Panel von 85 Rebproben validiert, von denen 10 mittels ELISA-Verfahren negativ, mit dieser neuen Methode jedoch positiv waren. Es wurde eine um den Faktor 125 höhere Empfindlichkeit der Echtzeit-RT-PCR im Vergleich zur klassischen RT-PCR festgestellt, und ihre Anwendung zum Nachweis von GLRaV-2 in Unterlagsreben hat ihre Überlegenheit insbesondere im Wurzelbereich gezeigt.