Antimitotiske og hormonelle effekter på fremstilling af grønne dobbelt-haploide planter ved hjælp af støvknapdyrkning af middelhavs-japonica-ris

Dobbelt-haploide (DH) risplanter fremstilles hovedsageligt ved hjælp af støvknapdyrkning. For at forbedre protokollen for støvknapdyrkning blev mikrosporer fra to japonica-risgenotyper (NRVC980385 og H28) udsat for tre kombinationer af vækstregulatorer og fire colchicin-behandlinger på induktionsmedium. Derudover blev en procedure efter støvknapdyrkning, der anvendte colchicin eller oryzalin, afprøvet for at fremkalde dobbelt-haploide planteløg fra haploide planteløg. En kold forbehandling af mikrosporer i 9 dage ved 10 °C øgede callusinduktionen 50 gange i genotypen NRCV980385. For begge genotyper gav 2 mg L−1 2,4-D og 1 mg L−1 kinetin på et colchicin-frit induktionsmedium de bedste dyrkningsresultater. Dyrkningsmulighederne for begge genotyper ændrede sig på induktionsmedier tilsat colchicin. Der blev registreret en høj genotypeafhængighed for callusinduktion, callusregenererende grønne plantuller og regenerering af grønne dobbelt-haploide plantuller. Colchicin ved 300 mg L−1 i 48 timer forstærkede callusinduktionen 100 gange i H28. Colchicin-tilskudte medier forbedrede tydeligt regenereringen af grønne dobbelt-haploide plantuller. Vi viste, at post-støvknap-dyrkningsbehandlingen af haploide plantuller med 500 mg L−1 colchicin gjorde det muligt at generere frugtbare dobbelt-haploide plantuller. Endelig blev en forbedret protokollen for flowcytometri med medium gennemstrømning for ris testet for at analysere alle plantullerne fra støvknap- og post-støvknap-dyrkning.