Antimitotinių ir hormoninių veiksnių įtaka žaliųjų dvigubai haploidinių augalų gaminimui, naudojant Viduržemio jūros regiono japonica ryžių dulkinių kultūrą

Ryžių dvigubai haploidiniai (DH) augalai daugiausia gaunami naudojant dulkinių kultūrą. Siekiant patobulinti dulkinių kultūros protokolą, dviejų japonikos ryžių genotipų (NRVC980385 ir H28) mikrosporos indukcijos terpėje buvo veikiamos trimis augimo reguliatorių deriniais ir keturiais kolchicino apdorojimais. Be to, buvo išbandyta po dulkinių kultūros procedūra, kurioje naudojamas kolchicinas arba orizalinas, siekiant iš haploidinių daigelių indukti dvigubai haploidinius daigelius. 9 dienų mikrosporų apdorojimas šaltu 10 °C temperatūros tirpalu 50 kartų padidino kaluso indukciją NRCV980385 genotipo atveju. Abiem genotipams geriausius kultivavimo rezultatus davė 2 mg L−1 2,4-D ir 1 mg L−1 kinetino naudojimas indukciniame terpėje be kolchicino. Abiejų genotipų kultivuojamumas pasikeitė indukciniame terpėje, papildytame kolchicinu. Buvo užfiksuota didelė genotipo priklausomybė nuo kaluso indukcijos, kaluso regeneruojančių žalių daigelių ir žalių dvigubų haploidinių daigelių regeneracijos. 300 mg L−1 kolchicinas 48 val. 100 kartų padidino kaluso indukciją H28 genotipe. Terpės, papildytos kolchicinu, akivaizdžiai pagerino žalių dvigubų haploidinių daigelių regeneraciją. Mes parodėme, kad haploidinių daigelių kultivavimas po dulkinių su 500 mg L−1 kolchicino leido susidaryti vaisingiems dvigubai haploidiniams daigeliams. Galiausiai buvo išbandytas patobulintas didelio našumo srauto citometrijos protokolas ryžiams, siekiant ištirti visus daigelius iš dulkinių ir po dulkinių kultivavimo.