Αντιμιτωτικές και ορμονικές επιδράσεις στην παραγωγή πράσινων διπλά απλοειδών φυτών μέσω καλλιέργειας ανθήρων ρυζιού japonica της Μεσογείου

Τα φυτά ρυζιού διπλού απλοειδούς (DH) παράγονται κυρίως μέσω καλλιέργειας ανθήρων. Προκειμένου να βελτιωθεί το πρωτόκολλο καλλιέργειας ανθήρων, μικροσπόρια δύο γονότυπων ρυζιού japonica (NRVC980385 και H28) υποβλήθηκαν σε τρεις συνδυασμούς ρυθμιστών ανάπτυξης και τέσσερις επεξεργασίες με κολχικίνη σε μέσο επαγωγής. Επιπλέον, δοκιμάστηκε μια διαδικασία μετά την καλλιέργεια ανθήρων με χρήση κολχικίνης ή ορυζαλίνης για την επαγωγή φυταρίων διπλού απλοειδούς από απλοειδή φυτάρια. Μια προ-επεξεργασία των μικροσπορίων σε ψυχρό περιβάλλον για 9 ημέρες στους 10 °C αύξησε την επαγωγή καλού 50 φορές στον γονότυπο NRCV980385. Και για τους δύο γονότυπους, 2 mg L−1 2,4-D και 1 mg L−1 κινιτίνη σε μέσο επαγωγής χωρίς κολχικίνη έδωσαν τις καλύτερες αποδόσεις καλλιέργειας. Η καλλιεργησιμότητα και των δύο γονότυπων μεταβλήθηκε σε μέσα επαγωγής εμπλουτισμένα με κολχικίνη. Καταγράφηκε υψηλή εξάρτηση από τον γονότυπο για την επαγωγή καλού, την αναγέννηση πράσινων φυταρίων από τον κάλο και την αναγέννηση πράσινων διπλών απλοειδών φυταρίων. Η κολχικίνη σε συγκέντρωση 300 mg L−1 για 48 ώρες ενίσχυσε την επαγωγή καλού κατά 100 φορές στον H28. Τα μέσα επαγωγής εμπλουτισμένα με κολχικίνη βελτίωσαν σαφώς την αναγέννηση πράσινων διπλών απλοειδών φυταρίων. Δείξαμε ότι η μετα-ανθήρια καλλιέργεια των απλοειδών φυταρίων σε συγκέντρωση 500 mg L−1 κολχικίνης επέτρεψε τη δημιουργία γόνιμων διπλά απλοειδών φυταρίων. Τέλος, δοκιμάστηκε ένα βελτιωμένο πρωτόκολλο κυτταρομετρίας ροής μέσης απόδοσης για το ρύζι, προκειμένου να αναλυθούν όλα τα φυτάρια από την ανθήρια και τη μετα-ανθήρια καλλιέργεια.